甲氨蝶呤(MTX)的釋放度分析論文范本

　　1 器材

　　Zeta Sizer 3000HS型激光粒度分析儀（英國Malvern公司）；SPA-400原子力顯微鏡（日本精工公司）；vc 130 探頭式超聲處理機（美國Sonics&Materials公司）；UV-1600紫外-可見分光光度計（北京瑞利）。聚乙交酯丙交酯（PLGA，成都航利生物材料研究所）；聚乙烯醇（湘中精細化學品廠）。甲氨蝶呤（MTX，浙江萬馬藥業公司）。

　　2 方法

　　2.1 納米顆粒的制備與表征參照文獻方法［3］，加以改進，稱取MTX 5 mg和50 mg PLGA［L:G=50:50，L:G為共聚物PLGA中乳酸（Lactide）和乙醇酸（Glycolide）單體的質量比］溶于2 ml二氯甲烷，滴加入8 ml質量百分比為2.5%聚乙烯醇水溶液中，在冰浴下用探針式的超聲波超聲10 min。減壓除去二氯甲烷，3 000 r/min離心分離，所得的沉淀用超純水洗滌3次，制得包載MTX的PLGA納米顆粒。取少許顆粒加水混勻稀釋，取樣滴于云母片上，自然干燥后，利用原子力顯微鏡表征納米顆粒形貌。載藥的納米顆粒的平均粒徑、粒度分布以及Zeta電位通過Malvren Zetasizer 3000HS分析儀測定。

　　2.2 納米顆粒的體外釋放凍干包載MTX的PLGA納米顆粒，精確稱取凍干粉末10 mg，溶于3 ml氯仿中，然后加入7 ml甲醇，沉淀聚合物，10 000 r/min離心10 min，以分光光度法測得上清液中MTX的含量。精密稱取10 mg凍干納米顆粒置于透析袋中，加入PBS緩沖溶液（pH=7.4）5 ml，將透析袋置于50 ml PBS緩沖溶液中，保持溫度37℃，每隔一定時間取1 ml（同時補充等量同溫介質），用分光光度法測定各時間點的MTX的含量，計算藥物的釋放率，繪制釋藥曲線。

　　3 結果

　　3.1 納米顆粒的特性表征本研究制備的包載MTX的PLGA納米顆粒為淺棕色的物質，Zeta電位為-18.7 mV，納米顆粒的原子力圖見圖1（a），制備出來的納米顆粒都為較完整的球形，分散性好，顆粒粒徑較均勻。粒徑分布如圖1（b）所示，顆粒的平均粒徑為175.9 nm，粒徑分布范圍為18～225 nm，其中小于51 nm占99%，顆粒大小基本上與原子力圖吻合。

　　3.2 體外藥物釋放曲線包載MTX的PLGA納米顆粒的體外釋放如圖2所示，該納米顆粒的體外釋放存在兩相，前4h處于快速釋放期，釋放的MTX累積量達到加入總量的.42.9%，在該階段，存在于顆粒表面的藥物較快地釋放出來；此后進入緩慢釋放期，隨后的68h釋放量相當于藥物總量的36.9%，存在于顆粒中的藥物逐漸釋放出來。

　　3.3 模型擬合R2為決定系數，是判斷回歸方程擬合度的重要指標。R2越趨向于1，擬合的效果越好［4，5］。由表2可見，包載MTX的PLGA納米顆粒的釋藥過程采用雙相動力學方程擬合得到的R2為0.995 7，最接近1。說明整個釋藥過程分為兩相，前期為快速釋放相，后期為緩慢釋放相，此釋藥特點符合緩釋原理。

　　甲氨蝶呤（MTX）是一種抗代謝類抗腫瘤藥物，對乳腺癌、急 性白血病、骨肉瘤等都具有顯著的療效，但其有引起骨髓抑制細胞下降，肝腎功能損傷等毒副作用，甚至危及患者生命［1,2］。為降低MTX的毒副作用，提高藥物療效，本研究以生物可降解材料聚乙交酯丙交酯（PLGA）為材料，制備了包載MTX的PLGA納米顆粒，考察其在PBS緩沖溶液的釋放行為，并采用多種數學模型擬合體外實驗數據，確定最佳的擬合模型。

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