立體觀察的實驗報告

時間：2024-11-05 09:32:49 方宇報告我要投稿

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立體觀察的實驗報告（精選8篇）

　　在人們素養不斷提高的今天，越來越多人會去使用報告，要注意報告在寫作時具有一定的格式。我敢肯定，大部分人都對寫報告很是頭疼的，以下是小編整理的立體觀察的實驗報告，歡迎閱讀，希望大家能夠喜歡。

立體觀察的實驗報告（精選8篇）

　　立體觀察的實驗報告篇1

　　一．目的

　　1、熟練掌握每種立體鏡的使用方法，利用立體鏡看出航片的立體效果。

　　2、了解橋式立體鏡和紅綠立體鏡的原理。

　　二、要求

　　1、禁止大聲喧嘩，隨意進出教室。保持課堂秩序。

　　2、不得隨意損壞涂抹照片，不得損壞眼鏡，各小組組長負責儀器和像片完好無損，損壞像片和儀器的要進行賠償。

　　三、儀器

　　每組一套立體像對，一個橋式立體鏡。

　　電腦一臺，紅綠立體鏡，數字影像。

　　四、方法和步驟

　　1、拿到兩張像片之后，首先觀察像片上一樣圖案的部分，把它們按照規定的順序擺放好。

　　2、尋找同名像點，把立體鏡擺放在同名像點的上方，左眼看左片的像點，右眼看右片的像點，仔細觀察，直到看出高低起伏的感覺。

　　用立體鏡進行像對立體觀察時，首先要將像片定向。像片定向是用針刺出每張像主點O1、O2，并將其轉刺于相鄰像片上O′1和O′2，在像片上畫出像片基線O1O′2和O′1O2，再在圖紙上畫一條直線，使兩張像片上基線O1O′2和O′1O2與直線重合，并使基線上一對相應像點間的距離略小于立體鏡的觀察基線。然后將立體鏡放在像對上，使立體鏡觀察基線與像片基線平行。同時用左眼看左像，右眼看右像。

　　開始觀察時，可能會有三個相同的影像（左、中、右）出現，這時要凝視中間清晰的目標（如道路、田地），如該目標在中間的影像出現雙影，可適當轉動像片，使影像重合，即可看出立體。

　　3、像對立體觀察的立體效果

　　在滿足立體觀察的條件下，隨著兩張像片放置方式的不同，就會產生不同的立體效應。

　　1）正立體效應

　　如果把左方攝影站獲得的像片放在左方用左眼觀察；右方攝影站攝取的像片放在右方用右眼觀察，這時獲得與觀察實物相似的立體效果，稱為正立體效應。

　　2）反立體效應

　　如果把左方攝站攝取的像片放在右方，用右眼觀察，右方攝站攝取的像片放在左方用左眼觀察，這時觀察到的立體影像的立體遠近恰好與實物相反，這種立體效應稱為反立體，或者在組成正立體效應后，將左右像片各旋轉180度，同樣可獲得一個反立體效應。即觀察得到的`立體感與實際情況相反，高山看起來變成深谷。

　　在量測中，用正反兩種立體效應交替進行立體觀察，可以檢查和提高立體量測。

　　3）零立體效應

　　將正立體情況下的兩張像片，在各自的平面內按同—方向旋轉90度，使像片上縱橫坐標互換方向，此時像對上原有的左右視差變為上下視差，即產生立體感的左右視差較不存在了，這時的立體視覺稱為零立體。

　　注意：電腦上的數字影像無需特殊技巧，戴上紅綠立體鏡看出立體效果即可。如果反著戴上眼鏡會看到反立體。

　　五、實驗報告

　　看出立體的同學可開始寫實驗報告（不少于500字），談談你對立體觀察的體會。

　　立體觀察的實驗報告篇2

　　目的：

　　（1）掌握使用立體鏡進行航空像片立體觀察的方法；

　　（2）練習航空攝影像片比例尺的計算方法；

　　（3）練習航片上像片重疊度計算的基本方法；

　　（4）練習計算航片上投影誤差的基本方法；

　　（5）練習計算航片上傾斜誤差的基本方法；

　　（6）掌握在航片上測量高差的方法。

　　要求：

　　（1）熟悉立體鏡主要部件的名稱和作用；

　　（2）熟悉立體鏡操作和使用；

　　（3）熟練掌握使用立體鏡進行航空像片立體觀察；

　　（4）熟悉航空攝影像片比例尺的作用；

　　（5）熟悉像片重疊度的計算方法；

　　（6）掌握計算航片上投影誤差的基本方法；

　　（7）掌握計算航片上傾斜誤差的基本方法；

　　（8）熟練掌握測量像點坐標的方法；

　　（9）熟練掌握左右視差計算；

　　（10）熟練掌握兩像點高差計算。

　　二、實驗準備

　　立體鏡——1、航空像片對——2（23cm×23cm）、計算機——1，Photshop，AutCAD圖形圖像處理系統，實驗航空像片圖像A，B，C。

　　三、方法與程序

　　（一）航空像片的立體觀察

　　1.立體觀察原理

　　利用航片進行人造立體觀察的條件是：必須是兩張相鄰且有部分重疊的像對；兩眼必須分別各看一張像片，通常稱之為“分像”；像片安放時，對應點的連線必須與現眼基線平行，且兩像片的距離需要調整，應與雙眼的交會角相適應；兩張像片的比例尺盡可能一致，最大差值不超過16%。

　　2.航空像片的立體觀察步驟

　　（1）準備像片：分別找出兩張連續航片66-9-F-12134、66-9-F-12135像對像主點os、ob。

　　（2）將航空像片按左右次序分開置于平整的桌面上，使影像的重疊部分向內，使像對像主點連線與基眼平行；左右像片間距與眼基線近似相等。

　　（3）安置立體鏡儀器：先在平整的桌面上，架腿伸開，調平鏡架。將立體鏡中央對準左右像片的小縫。

　　（4）先用兩個食指在立體鏡下分別指著兩張像片的對應點，然后，左右移動食指（連同像片），直至看到兩個食指重合在一起，此時就可以看到較好的立體效果；且觀察時沒有不適的感覺；

　　（5）當立體像對范圍內高差太大時，在某一部分不易同時看出山頂及山谷的立體模型，需調整基線長度，才能實現立體觀察。

　　（6）若將左像片與右像片對調，則獲得與實際相反的立體，稱為反立體效應。

　　（二）航空像片的高程測量和計算

　　已知：航片上Oa和Ob分別為航片A和航片B的像主點，在航片A上，Ob點為航片B像主點在航片A的位置；

　　E點和待計算點F的位置，分別標注在航片A的航片B上，E點的高度為650m；

　　1. 分別在航片A和航片B上量取E、F的像點坐標；

　　像點坐標：通常采用以方位線為軸的直角坐標系。像主點為坐標原點，像片像點E1和E2的坐標分別為（2.82，2.85）和（-2.5，-2.8）

　　（2）計算像點E和F的左右視差

　　像點的左右視差又稱橫視差，是指像對同名像點坐標之差，即左像片像點的橫坐標減去右像片像點的橫坐標，以P表示

　　PE=XE1-XE2=2.82-（-2.5）=5.32cm

　　PF=XF1-XF2=2.8-（-2.62）=5.42cm

　　（3）計算出F點對E點的左右視差較

　　P=PF-PE=5.42-5.32=0.1cm

　　（4）計算F點和E點的高差 h=H10640mP=0.1cm=196.31m PP5.32cm0.1cm

　　2. 計算航片的比例尺

　　已知攝影焦距f值為152mm，航高H為10640m，則比例尺為

　　1f1152mm7= =m=mHm10640m100

　　3. 計算航片上像片重疊度

　　（1）將航片A和航片B上的A、B點重合，航片A上AB連線的`右邊部分為航片A與航片B的航向重疊，以Px表示，Px=8.8cm

　　（2）將航片B和航片C上的C、D點重合，航片B上CD連線到航片底邊的距離為航片B與航片C的旁向重疊，以Py表示，Py=3.9cm

　　（3）量取航片的寬幅，以lx和ly表示，lx=13.6cm，ly=14.3cm

　　（4）計算航向重疊寬度與航片幅寬之比即為航向重疊度

　　Px%=Px8.8cm=%=64.71% 13.6cmlx

　　（5）計算旁向重疊寬度與航片幅寬之比即為旁向重疊度

　　Py%=Py

　　ly=3.9cm%=27.27% 14.3cm

　　4. 計算航片上的投影誤差

　　（1）在中心投影的像片上，地形的起伏除了引起像片比例尺的變化外，還會引起平面

　　上點位在像片上相對位置的平移，這種現象稱為像點位移，其位移量就是中心投影與垂直投影在同一水平面上的投影誤差

　　h=hr H

　　H為地面高差；r為像點到像主點的距離；H攝影高度

　　（2）在航片A上，Oa是像主點，e點的高差為200m，Oa到e的距離為3cm則e的投影誤差為

　　h=hr200m3cm4==5.6410 H10640m

　　五、實驗心得

　　這是我們第一次接觸立體鏡，做實驗時開始都不知道怎么看，也看不出什么效果。后來慢慢觀察才知道其中的奧妙，當看出立體效果時特別的激動。感覺儀器特別簡單，沒想到有那樣的效果，高低起伏特別的明顯。這次試驗其實主要做的就是觀察，之后的計算也有一點麻煩，那直線畫的不怎么準確，所以計算結果也有一定的差異。

　　立體觀察的實驗報告篇3

　　一、實驗名稱：

　　用顯微鏡觀察洋蔥表皮細胞

　　二、實驗材料：

　　顯微鏡、洋蔥表皮細胞切片，及其他細胞裝片。

　　三、實驗步驟：

　　1、右手握住鏡臂，左手托住鏡座，把顯微鏡向著光放在實驗臺上。

　　2、對光：轉動轉換器，使低倍物鏡對準通光孔。

　　3、調節載物臺下的反光鏡，從目鏡往下看，能看見亮的光圈。

　　4、觀察：調節粗準焦螺旋，把所要觀察的'洋蔥表皮切片放在載物臺上，用壓片夾夾住，標本要正對通光孔的中央。

　　5、左眼向目鏡內看，同時轉動粗準焦螺旋等，直到看清切片上的細胞為止，最后整理器材。

　　四、使用注意事項：

　　1、取送顯微鏡時，應右手握住鏡臂，左手托住鏡座，輕拿輕放。

　　2、鏡檢時，坐姿端正，一般用左眼觀察物象，用右眼看著實驗報告紙畫圖。兩眼須同時睜開。

　　3、切忌一面從目鏡進行觀察，一面使鏡筒下降，這樣容易使物鏡與玻片標本碰撞而損壞。

　　4、在高倍鏡下調節焦距時，切勿使用粗調節器，以免壓壞標本，損壞物鏡。

　　5、顯微鏡使用完畢必須先上升鏡筒，移開鏡頭后再取出玻片標本，以免取玻片時擦損鏡頭的鏡面。

　　五、實驗原理：

　　利用教學顯微鏡觀察洋蔥表皮細胞。

　　六、創新點：

　　在實驗過程中為學生提供多種細胞裝片，以供學生操作、觀察，增加了學生動手實驗的時間，使學生在實驗中經歷調節顯微鏡的焦距的過程，從而熟練掌握教學教學顯微鏡的使用方法。

　　立體觀察的實驗報告篇4

　　一、實驗目的

　　1、了解環境因素對酶活性的影響及酶的高效性；

　　2、掌握酶定性分析的方法和注意事項。

　　二、基本原理

　　1、酶是生物催化劑，具有極高的催化效率，其催化效率比一般催化劑高106~1013、在生物體內過氧化氫酶能催化H2O2分解成H2O和O2，鐵粉地H2O2分解也有催化作用，但其效率遠低于酶。

　　2、酶的活性受溫度的影響。在一定的溫度范圍內，溫度升高，酶的活性也會增大。當到了最大值后，此時溫度為酶的最適溫度，由于溫度過高，酶開始失活，導致酶的效率降低，最后完全失活。

　　3、酶的活性受PH值的影響。酶在一定范圍的PH值下才有活性，高于或低于最適PH，都會使酶的活性降低。

　　4、酶活性常受到某些物質的影響。有些物質能使酶的活性增加，稱為激活劑，有些物質能使酶的活性降低，稱為抵制劑。

　　5、碘液指示淀粉水解程度的不同色變化：

　　淀粉淀粉酶紫色糊精淀粉酶暗褐糊精淀粉酶紅色糊精淀粉酶麥芽糖+少量葡萄糖加碘后：藍色紫紅色暗褐色紅棕色?黃色

　　三、試劑與器材

　　（一）實驗目的

　　觀察淀粉在水解過程中遇碘后溶液顏色的變化。觀察溫度、pH、激活劑與抑制劑對唾液淀粉酶活性的影響。

　　（二）實驗原理

　　人唾液中淀粉酶為α-淀粉酶，在唾液腺細胞中合成。在唾液淀粉酶的作用下，淀粉水解，經過一系列被稱為糊精的中間產物，最后生成麥芽糖和葡萄糖。變化過程如下：

　　淀粉→紫色糊精→紅色糊精→麥芽糖、葡萄糖

　　淀粉、紫色糊精、紅色糊精遇碘后分別呈藍色、紫色與紅色、麥芽糖和葡萄糖遇碘不變色。

　　淀粉與糊精無還原性，或還原性很弱，對班氏試劑呈陰性反應。麥芽糖與葡萄糖是還原性糖，與班氏試劑共熱后生成紅棕色氧化亞銅的沉淀。

　　唾液淀粉酶的最適溫度為37-40°C，最適pH為6、8、偏離此最適環境時，酶的活性減弱。

　　低濃度的Cl-離子能增加淀粉酶的活性，是它的激活劑。Cu2+等金屬離子能降低該酶的活性，是它的抑制劑。

　　（三）器材及試劑

　　1、器材：試管、酒精燈、燒杯、恒溫水浴鍋、量筒、冰浴、玻璃棒、試管夾、白磁板、試管架、鐵三腳架、唾液淀粉酶

　　2、試劑：1％淀粉溶液、碘液、班氏試劑、0、4％HCl溶液、0、1％的乳酸溶液、1％NaCl溶液、1％CuSO4溶液、0、1％淀粉溶液

　　（四）操作步驟

　　1、淀粉酶活性的檢測：取一只試管，注入1％淀粉溶液5mL與稀釋的唾液0、5-2mL。混勻后插入1支玻璃棒，將試管連同玻璃棒置于37°C水浴中。不是的用玻璃棒從試管中取出1滴溶液，滴加在白磁板上，隨即滴加1滴碘液，觀察溶液呈現的顏色。此實驗延續至溶液僅表現碘被稀釋后的微黃色為止。記錄淀粉在水解過程中，遇碘后溶液顏色的變化。

　　向上面的剩余溶液中加2mL班氏試劑，放入沸水中加熱10分鐘左右，觀察現象

　　2、pH對酶活性的影響：取4支試管，分別加入0、4％鹽酸、0、1％乳酸、蒸餾水與1％碳酸鈉各2mL，再向以上四支試管中各加2mL1％淀粉溶液及2mL淀粉酶試劑，在沸水浴中加熱，根據生成紅棕色沉淀的多少，說明淀粉水解的強弱。

　　3、溫度對酶活性的影響：取3支試管，各加3mL1％淀粉溶液；另取3支試管，各加1mL淀粉酶液。將此6支試管分為3組，每組中盛淀粉溶液與淀粉酶液的'試管各1支，三組試管分別置于0°C、37°C與70°C的水浴中。5分鐘后，將各組中的淀粉溶液倒入淀粉酶液中，繼續維持原溫度條件5min后，立即加2滴碘液，觀察溶液顏色的變化。根據觀察結果說明溫度對酶活性的影響。

　　4、激活劑與抑制劑對酶活性的影響：取3支試管，按下表加入各種試劑。混勻后，置于37°C水浴中的保溫。從1號試管中用玻璃棒取出1滴溶液，置于白磁板上用碘液檢查淀粉的水解程度。待1號試管內的溶液遇碘不再變色后，立即取出所有的試管，各加碘液2滴，觀察溶液顏色的變化，并解釋之。

　　1、加入班氏試劑后

　　2、PH值對酶活性影響：1號深紅色，2號為紅棕色，3號為磚紅色，4號為偏藍。因為PH＝1時，超出了淀粉酶有效PH范圍，使得酶完全失活，淀粉沒有被分解。2號是因為PH=5時，不是淀粉酶的最適范圍。3號是因為PH＝7時，為淀粉酶分解的最適PH，淀粉被酶迅速分解生成麥芽糖和葡萄糖。而4號則是因為PH＝9超出了淀粉酶的適宜PH，活性受到或者是部分失活，使淀粉分解較慢。

　　3、溫度對酶的影響：1號顯紫紅色，2號為淡黃色，3號為深藍色。當溫度為0度時，蛋白質分子的熱運動減慢，即酶分子的活性受到了抑制，使酶的活性降低了，淀粉分解減慢，生成紫紅色的糊精；2號處于37度，接近人體溫度，酶的活化性能較高，淀粉被分解成麥芽糖和葡萄糖就越快，所以是淡黃色，而當溫度為70度時，由于酶是蛋白質，遇到高溫時會失活，所以淀粉沒有被分解。

　　4、激活劑和抑制劑對酶的影響：3號作為對照實驗組，顯紅棕色，1號顯淺黃色，2號顯深藍色。因為在1號溶液中，NaCl對酶的活性在增加作用，激活了淀粉酶，淀粉酶迅速把淀粉分解成麥芽糖和葡萄糖，滴加碘液時，溶液顯淺黃色，而對照組顯示紅棕色，表明淀粉被分解成了糊精，在1號中，溶液中的淀粉沒有被分解遇碘變藍，通過對比1和3號，2和3號，由顏色的變化，判斷淀粉水解程度為1<3<2，說明了NaCl具有激活作用，CuSO4具有抑制作用。

　　結論：

　　酶催化特定化學反應的蛋白質、RNA或其復合體。是生物催化劑，能通過降低化學反應的活化能加快反應速率，但不改變反應的平衡點。

　　立體觀察的實驗報告篇5

　　實驗名稱：

　　觀察洋蔥表皮細胞。

　　實驗目的：

　　1、學習制作洋蔥表皮玻片標本。

　　2、學會使用顯微鏡觀察洋蔥表皮，用圖畫記錄觀察到的洋蔥表皮細胞。

　　3、對比用肉眼、放大鏡、顯微鏡看到的洋蔥表皮各有什么不同。

　　實驗重點：

　　用顯微鏡觀察洋蔥表皮細胞。

　　實驗難點：

　　正確使用顯微鏡。

　　實驗準備：

　　分組實驗器材：顯微鏡、洋蔥、小刀、清水、滴管、吸水紙、載玻片、蓋玻片、鑷子、放大鏡等。實驗過程：

　　一、導入課題

　　出示洋蔥。問：如果從它的內表皮上揭下一塊，用顯微鏡來觀察能看到些什么呢？（板書課題）

　　二、制作洋蔥表皮玻片標本

　　1、師講解并演示制作洋蔥表皮玻片標本的方法與步驟。

　　（1）在一個干凈的玻璃載片中間滴一滴清水；

　　（2）用小刀在洋蔥鱗葉片內壁劃一個“井”字，用鑷子取下“井”中洋蔥內表皮放到載玻片的水滴中央，注意標本要平展開，不能折疊；

　　（3）用蓋玻片傾斜著蓋到標本上面，放蓋玻片時，先放一端，再慢慢放下另一端，注意不要有氣泡。如水不足，可沿蓋玻片邊緣滴加；若水分過多，可用吸水紙吸掉；

　　（4）從蓋玻片的一邊滴一滴稀釋的碘酒，并把玻片微微傾斜，再在蓋玻片的另一邊用吸水紙吸掉多余的水；

　　（5）洋蔥表皮玻片標本做成可進行觀察。

　　2、學生以組為單位自制玻片標本（最好制三份裝片，便于下面的對比觀察），教師巡視指導（教育學生注意安全）。

　　三、觀察洋蔥表皮細胞

　　1、先用肉眼觀察洋蔥表皮將看到的內容畫在科學記錄本上。

　　2、再用放大鏡觀察洋蔥表皮將看到的內容畫到科學記錄本上。

　　3、學生交流用肉眼和放大鏡分別觀察到什么？它們有何不同？

　　4、利用顯微鏡觀察洋蔥表皮細胞。

　　（1）出示顯微鏡，引導學生認識顯微鏡，簡介各部分的名稱、功能及使用方法，學生每5人一組操作熟悉顯微鏡。

　　（2）各組利用顯微鏡觀察洋蔥表皮細胞。（師操作演示：安放――對光――上片――調焦――觀察。生一步步跟著操作。）

　　（3）學生觀察、記錄、描畫洋蔥表皮細胞。教師巡視指導，各組的實驗組長監督組員操作是否規范，要求每個人都要操作、都要觀察，并將觀察結果進行交流。組長將大家在顯微鏡下的發現畫到科學記錄本上。

　　5、全班交流在顯微鏡下的發現。

　　（1）各組推薦發言代表談自己的發現。

　　（2）各組將所畫的觀察結果向全班展示。

　　（3）交流討論評價。

　　6、師小結：我們發現放大鏡比肉眼、顯微鏡比放大鏡看到的.細節更多，更清楚。我們發現洋蔥表皮是由一個個比較規則的多邊形組成的，而且大多呈長方形，外為細胞壁，內為無色細胞質和細胞核。洋蔥表皮上的一個個小房間似的結構，就是洋蔥的細胞。（師一邊描述一邊畫洋蔥細胞簡圖）

　　四、實驗結束。

　　回收實驗器材，整理實驗桌。

　　立體觀察的實驗報告篇6

　　一、研究背景及目的

　　酶是高效催化有機體新陳代謝各步反應的活性蛋白，幾乎所有的生化反應都離不開酶的催化，所以酶在生物體內扮演著極其重要的角色，因此對酶的研究有著非常重要的意義。酶的活力是酶的重要參數，反映的是酶的催化能力，因此測定酶活力是研究酶的基礎。酶活力由酶活力單位表征，通過計算適宜條件下一定時間內一定量的酶催化生成產物的量得到淀粉酶是水解淀粉的糖苷鍵的一類酶的總稱，按照其水解淀粉的作用方式，可分為α-淀粉酶和β-淀粉酶等。α-淀粉酶和β-淀粉酶是其中最主要的兩種，存在于禾谷類的種子中。β-淀粉酶存在于休眠的種子中，而α-淀粉酶是在種子萌發過程中形成的。

　　α-淀粉酶活性是衡量小麥穗發芽的一個生理指標，α-淀粉酶活性低的品種抗穗發芽，反之則易穗發芽。目前，關于α-淀粉酶活性的測定方法很多種，活力單位的定義也各不相同，國內外測定α-淀粉酶活性的方法常用的有凝膠擴散法、3，5-二硝基水楊酸比色法和降落值法。

　　二、實驗原理

　　萌發的種子中存在兩種淀粉酶，分別是α-淀粉酶和β-淀粉酶，β-淀粉酶不耐熱，在高溫下易鈍化，而α-淀粉酶不耐酸，在pH3.6下則發生鈍化。本實驗的設計利用β-淀粉酶不耐熱的特性，在高溫下（70℃）下處理使得β-淀粉酶鈍化而測定α-淀粉酶的酶活性。

　　酶活性的測定是通過測定一定量的酶在一定時間內催化得到的麥芽糖的量來實現的，淀粉酶水解淀粉生成的麥芽糖，可用3，5-二硝基水楊酸試劑測定，由于麥芽糖能將后者還原生成硝基氨基水楊酸的顯色基團，將其顏色的深淺與糖的含量成正比，故可求出麥芽糖的含量。常用單位時間內生成麥芽糖的毫克數表示淀粉酶活性的大小。然后利用同樣的原理測得兩種淀粉酶的總活性。實驗中為了消除非酶促反應引起的麥芽糖的生成帶來的誤差，每組實驗都做了相應的對照實驗，在最終計算酶的活性時以測量組的值減去對照組的值加以校正。

　　在實驗中要嚴格控制溫度及時間，以減小誤差。并且在酶的作用過程中，四支測定管及空白管不要混淆。

　　三、材料、試劑與儀器

　　實驗材料：

　　萌發的小麥種子（芽長1厘米左右）儀器：

　　722光柵分光光度計(編號990695)

　　DK-S24型電熱恒溫水浴鍋(編號L-304056)離心機(TDL-40B)

　　容量瓶：50ml×1，100ml×1小臺秤研缽

　　具塞刻度試管：15ml×6試管：8支移液器燒杯試劑：

　　①1%淀粉溶液（稱取1克可溶性淀粉，加入80ml蒸餾水，加熱熔解，冷卻后定容至100ml）；

　　②pH5.6的檸檬緩沖液：

　　A液（稱取檸檬酸20.01克，溶解后定容至1L）B液（稱取檸檬酸鈉29.41克，溶解后定容至1L）

　　取A液5.5ml、B液14.5ml混勻即為pH5.5檸檬酸緩沖液；

　　③3，5-二硝基水楊酸溶液（稱取3，5-二硝基水楊酸1.00克，溶于20ml1M氫氧化鈉中，加入50ml蒸餾水，再加入30克酒石酸鈉，待溶解后，用蒸餾水稀釋至100ml，蓋緊瓶蓋保存）；

　　④麥芽糖標準液（稱取0.100克麥芽糖，溶于少量蒸餾水中，小心移入100ml容量瓶中定容）；

　　⑤0.4MNaOH

　　四、實驗步驟

　　1、酶液的制備

　　稱取2克萌發的小麥種子與研缽中，加少量石英砂，研磨至勻漿，轉移到50ml容量瓶中用蒸餾水定容至刻度，混勻后在室溫下放置，每隔數分鐘振蕩一次，提取15-20分鐘，于3500轉/分離心20分鐘，取上清液備用。

　　2、α-淀粉酶活性的測定

　　①取4支管，注明2支為對照管，另2支為測定管

　　②于每管中各加酶提取液液1ml，在70℃恒溫水浴中（水浴溫度的變化不應超過±0.5℃）準確加熱15min，在此期間β-淀粉酶鈍化，取出后迅速在冰浴中徹底冷卻。

　　③在試管中各加入1ml檸檬酸緩沖液

　　④向兩支對照管中各加入4ml0.4MNaOH，以鈍化酶的活性

　　⑤將測定管和對照管置于40℃（±0.5℃）恒溫水浴中準確保溫15min再向各管分別加入40℃下預熱的淀粉溶液2ml，搖勻，立即放入40℃水浴中準確保溫5min后取出，向兩支測定管分別迅速加入4ml0.4MNaOH，以終止酶的活性，然后準備下步糖的測定。

　　3、兩種淀粉酶總活性的測定

　　取上述酶液5ml于100ml容量瓶中，用蒸餾水稀釋至刻度（稀釋倍數視樣品酶活性大小而定，一般為20倍）。混合均勻后，取4支管，注明2支為對照管，另2支為測定管，各管加入1ml稀釋后的酶液及pH5.6檸檬酸緩沖液1ml，以下步驟重復α-淀粉酶測定的第④及第⑤的操作。

　　4、麥芽糖的測定

　　⑴標準曲線的制作

　　取15ml具塞試管7支，編號，分別加入麥芽糖標準液（1mg/ml)0、0.1、0.3、0.5、0.7、0.9、1.0毫升，用蒸餾水補充至1.0ml，搖勻后再加入3，5-二硝基水楊酸1ml，搖勻，沸水浴中準確保溫5min，取出冷卻，用蒸餾水稀釋至15ml，搖勻后用分光光度計于520nm波長下比色，記錄消光值，以消光值為縱坐標，以麥芽糖含量為橫坐標繪制標準曲線。

　　⑵樣品的測定

　　取15ml具塞試管8支，編號，分別加入步驟2和3中各管的溶液各1ml，再加入3，5-二硝基水楊酸1ml，搖勻，沸水浴中準確煮沸5min，取出冷卻，用蒸餾水稀釋至15ml，搖勻后用分光光度計于520nm波長下比色，記錄消光值，根據標準曲線進行結果計算。

　　五、數據整理及計算

　　上表中前4行數據為實驗的原始數據。以表中前兩行數據繪制標準曲線（見下頁），計算上表中第4行數據（各樣品的OD值）均值，填入上第5行中，根據標準曲線的方程，計算第5行OD值所對應的麥芽糖濃度，填入最后一行，如上表。

　　根據以上的數據整理的結果，結合以下公式計算兩種淀粉酶的活性：

　　淀粉酶活性（毫克麥芽糖克·1鮮重分鐘·1）

　　（A－A'）樣品稀釋總體積

　　樣品重（g）5

　　（B－B'）樣品稀釋總體積

　　淀粉酶活性（毫克麥芽糖克1鮮重分鐘1）

　　樣品重（g）5

　　A——α-淀粉酶測定管中的麥芽糖濃度

　　A’——α-淀粉酶對照管中的淀粉酶的濃度

　　B——(α-+β-)淀粉酶總活性測定管中的麥芽糖濃度B’——(α-+β-)淀粉酶總活性對照管中的麥芽糖濃度計算結果如下：

　　α-淀粉酶活性（毫克麥芽糖克-1鮮重分鐘-1）

　　(α-+β-)淀粉酶活性（毫克麥芽糖克-1鮮重分鐘-1）β-淀粉酶活性-1鮮重分鐘-1）

　　六、結果分析

　　七、思考題

　　1、酶活力測定實驗的總體設計思路是什么？實驗設計的關鍵你認為是什么？為什么？答：利用酶的專一性或酶活力的影響因素抑制除待測酶以外的其它酶活性，通過測酶促反應的產率推算酶活力大小。

　　關鍵在于抑制其它酶的活力而不影響測定酶，這樣可以減小或避免其它酶產物給測定結果帶來的誤差。

　　2、本實驗最易產生對結果有較大誤差影響的操作是哪些步驟？為什么？怎樣的操作策略可以盡量減少誤差？

　　答：

　　①浸提步驟。70℃溫度或15min時間控制不嚴格不準確則可能導致β淀粉酶未完全鈍化使測得活性偏大。應嚴格控制溫度和時間。

　　②70℃水浴后需要立即冰浴，否則β淀粉酶復性使測得α淀粉酶活性結果偏大。

　　③向測定管中加入NaOH時應迅速，否則酶與底物繼續反應使結果偏大。

　　3、-淀粉酶活性測定時70℃水浴為何要嚴格保溫15分鐘？保溫后為何要立即于冰浴中驟冷？

　　答：由于-淀粉酶不耐熱，在70℃下處理一定時間可以鈍化，嚴格保溫15分鐘可以達到理想的鈍化效果，時間過長，-淀粉酶活性也會受到影響；時間不足，-淀粉酶鈍化不完全。保溫后立即驟冷是為了通過劇烈的溫變改變-淀粉酶的結構以防止在隨后的反應中復性，這樣就保證了在隨后的40℃溫浴的.酶促反應中-淀粉酶不會再參與催化反應。此外我認為冰浴使酶迅速降溫，便于嚴格控制高溫處理時間的長短。

　　4、pH5.6檸檬酸緩沖液的作用？各管于40℃水浴準確保溫15分鐘的作用？

　　答：酶實驗體系的pH值變化或變化過大，會使酶活性下降甚至完全失活。加入pH5.6的緩沖液調至酶促反應的最適pH，同時穩定溶液的pH不至于在反應過程中大幅波動。40℃水浴準確保溫15分鐘為調整酶促反應的最適溫度

　　5、眾多測定淀粉酶活力的實驗設計中一般均采取鈍化-淀粉酶的活力而測-淀粉酶和測總酶活力的策略，為何不采取鈍化-淀粉酶活力去測-淀粉酶活力呢？這種設計思路說明什么？

　　答：β淀粉酶與α淀粉酶的催化特性是有差異的。β淀粉酶主要作用于直鏈淀粉的α-1，4-糖苷鍵，而且僅從淀粉分子外圍的非還原性末端開始，切斷至α-1，6-鍵的前面反應就停止了；而α淀粉酶則無差別地作用于直鏈淀粉與支鏈淀粉的α-1，4-糖苷鍵，所以β淀粉酶需要α淀粉酶淀粉支鏈的α-1，4-糖苷鍵后才能完全體現其催化能力。此外我認為在實驗中溫度比酸度更易控制，鈍化α淀粉酶難度遠遠高于β淀粉酶，而且若提高酸度鈍化α淀粉酶，則回調最適pH時α淀粉酶也有可能由于復性恢復活力。

　　這種設計思路說明在測定酶的比活力時要綜合考慮各種可能出現的酶的性質以及它們之間的聯系，也要考慮到實驗操作的可行性。

　　6、本實驗中所設置的對照管的作用？它與比色法測定物質含量實驗中設置的空白管有何異同？本實驗可否用對照管調分光光度計的100%T？為什么？

　　答：消除非酶促反應（如淀粉酸性環境下加熱水解）和非測定時間內的酶促反應引起的麥芽糖的生成帶來的誤差。

　　兩種都是為了消除非測定部分對光的吸收，空白組是為了消除溶液中溶劑等其它組分對光的吸收，而對照管是為了消除非測量所需反應所得的多余溶質對光的吸收。

　　不可，因為標準曲線的確定是在空白的基礎上的，得到的是OD值與麥芽糖含量的關系

　　7、我們所測定得到的總酶活力減去所測定得到的-淀粉酶活力是否就等于-淀粉酶活力？為什么？你的結論說明什么？答：不等于。因為β淀粉酶和α淀粉酶作用于α-1，4糖苷鍵，但二者都不能水解支鏈的α-1，6-糖苷鍵，而我們所測定得到的總酶活力是二者在與R酶的共同作用下測得的酶活力，R酶能夠降解支鏈淀粉，斷裂α-1，6-糖苷鍵，從而增大了β淀粉酶和α淀粉酶可水解的底物濃度，使測得的總活力大于β淀粉酶和α淀粉酶單獨作用的酶活力之和。我的結論說明實驗時要考慮各種酶協同作用的綜合因素