機(jī)能實(shí)驗(yàn)報(bào)告
Ach對離體家兔小腸運(yùn)動作用
摘要
目的：觀察乙酰膽堿對離體家兔小腸腸肌的影響和機(jī)制。方法：將離體小腸固定在離體小腸灌流裝置里，在保證各影響因素不相互干擾的情況下,分別給予家兔離體腸肌標(biāo)本生理鹽水（Nacl）、Ach、阿托品、阿托品+乙酰膽堿刺激，完成每次刺激并出現(xiàn)明顯現(xiàn)象后用38℃的臺氏液沖洗腸肌標(biāo)本，觀察其收縮活動的特點(diǎn)并記錄。結(jié)果：結(jié)果顯示當(dāng)?shù)渭由睇}水（Nacl）刺激離體腸肌時(shí)，張力曲線沒什么變化；當(dāng)用乙酰膽堿刺激離體腸肌時(shí)，張力曲線則明顯上升，且頻率加快；當(dāng)?shù)渭影⑼衅反碳r(shí)，張力曲線明顯下降，且頻率減慢；當(dāng)?shù)渭右阴Ｄ憠A加上阿托品刺激時(shí)，張力曲線變化較不規(guī)則。結(jié)論：乙酰膽堿（Ach）對離體家兔腸肌有增強(qiáng)其運(yùn)動的作用，且作用于M受體。 中文關(guān)鍵詞：離體家兔小腸腸肌；乙酰膽堿；張力曲線 Abstract：
Objective: to observe the acetylcholine on the influence and mechanism of intestinal muscle of rabbit small intestine in vitro. Methods: in vitro small intestine in vitro intestinal perfusion device fixed, in guarantee under the condition of each influence factor does not interfere with each other, in vitro intestinal muscle specimens were given the rabbit saline (Nacl), Ach, atropine, atropine + acetylcholine stimulation, complete with 38 ℃ after each stimulus and a significant phenomenon of Taiwan's fluid colonics muscle specimens and observe the characteristics of its contraction activities and record. Results: the results showed that when add saline (Nacl) stimulation in vitro intestinal muscle, nothing change tension curve; When using the acetylcholine stimulation in vitro intestinal muscle, tension curves are obvious rise, and the frequency to speed up; When add atropine stimulation, tension curve decreased obviously, and slow frequency; When add the acetylcholine and atropine on, tension curve is irregular. Conclusion: acetylcholine (Ach) on in vitro rabbit intestinal muscle has enhanced the role of the movement, and the effects on M receptor.
[Key words]：Isolated rabbit intestinal muscle;Acetyl choline；Tension curve.
引言
消化道平滑肌與骨骼肌、心肌一樣，具有肌肉組織共有的特性，如興奮性、傳導(dǎo)性和收縮性等。但消化道平滑肌興奮性較低，收縮緩慢，富有伸展性，具有緊張性、自動節(jié)律性，對化學(xué)、溫度和機(jī)械牽張刺激較敏感等特點(diǎn)。給予離體腸肌以接近與在體情況的適宜環(huán)境，消化道平滑肌仍可保持良好的生理特性。Ach能激動M受體，而阿托品能阻斷M受體。
1.材料和方法
1,1材料:家兔、HSS-1（B）型恒溫浴槽、臺氏溶液、生理鹽水、Ach、阿托品、通氣機(jī)、超級恒溫器、張力換能器、生物信號采集處理系統(tǒng) ；
1.2方法：（1）實(shí)驗(yàn)裝置準(zhǔn)備和儀器參數(shù)設(shè)置:把臺式液在恒溫器中加熱并保持到38℃左右，然后在麥?zhǔn)显〔壑屑尤胍欢康?8℃左右的臺式液。通氣管接95%O2+5%CO2混合氣體。用螺絲夾調(diào)節(jié)氣體管道的氣體流量，調(diào)節(jié)至浴槽中氣體一個(gè)個(gè)逸出為止。換能器輸出線接微機(jī)生物信號處理系統(tǒng)，設(shè)置好相關(guān)儀器參數(shù)；
（2）離體家兔十二指腸標(biāo)本制作:取家兔一只，用木槌擊其頭部至?xí)灒⒓雌书_腹腔，找到
十二指腸，取出十二指腸，置于冰冷的氧飽和的臺氏液培養(yǎng)皿中，沿腸壁除去腸系膜，用5ml注射器取臺氏液將腸內(nèi)容物沖洗干凈，然后將十二指腸剪成1-2cm數(shù)小段，換以新鮮，通入95%氧氣和5%二氧化碳的混合氣體的臺氏液備用。把十二指腸管置于有臺氏液的培養(yǎng)皿中，然后穿線結(jié)扎2cmz左右腸肌的兩端，然后把通混合氣體的機(jī)制放在浴槽中一會；
（3）標(biāo)本固定：腸管一端連線系于浴槽固定鉤上，然后放入38℃HSS-1（B）型恒溫浴槽中，再將腸管另一端系結(jié)在張力換能器的懸梁壁上，調(diào)節(jié)肌張力1.87g，在其中加入20ml的38℃的臺氏液； （4）實(shí)驗(yàn)觀察：離體腸管在浴槽中穩(wěn)定適當(dāng)時(shí)間后，記錄一段正常張力曲線。然后滴加0.2ml的生理鹽水，觀察并記錄其曲線張力，反應(yīng)穩(wěn)定換液沖洗，以此方法依次做如表1.的添加實(shí)驗(yàn)；
（5）數(shù)據(jù)的記錄：將實(shí)驗(yàn)所得的一組曲線進(jìn)行選擇，將曲線變化明顯且能夠較好反應(yīng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的曲線進(jìn)行編輯，并記錄收縮頻率、幅度等值，做成文檔保存并進(jìn)行拷貝。
2.結(jié)果
在正常情況下，離體腸肌收縮的幅度、頻率、張力、時(shí)間及間隔都相對穩(wěn)定，波形沒有明顯的變化;加入生理鹽水后，離體腸肌張力曲線沒有什么變化;加入Ach后，離體腸肌張力曲線明顯上升，收縮幅度減小，頻率加快;加入阿托品后，離體腸肌張力曲線下降，振幅減小，頻率減慢;加入乙酰膽堿和阿托品混合液后，離體腸肌張力曲線變化不規(guī)則。 2.1生理鹽水對離體家兔腸肌運(yùn)動的影響
2.2乙酰膽堿對離體家兔腸肌運(yùn)動的影響
2.3阿托品對離體家兔腸肌運(yùn)動的影響
2.4阿托品5個(gè)波后加乙酰膽堿對離體家兔腸肌運(yùn)動的影響
3.討論
3.1在恒溫通氣的情況下，離體小腸平滑肌能自發(fā)地有節(jié)律地進(jìn)行收縮，其收縮的幅度、頻率、張力、時(shí)間及間隔都相對穩(wěn)定，波形沒有明顯的變化。在此條件下，腸段生活的環(huán)境與在體內(nèi)的環(huán)境相似，所以它的表現(xiàn)正常；
3.2乙酰膽堿（Ach） 對離體腸運(yùn)動的影響：Ach是一種神經(jīng)遞質(zhì)，能特異性的作用于各類膽堿能受體。Ach可明顯興奮胃腸道平滑肌，使其收縮幅度、張力、蠕動增加。其作用機(jī)制是：Ach作用于十二指腸M受體，使平滑肌Ca2+通道開放，Ca2+內(nèi)流，Ca2+胞漿濃度增加，平滑肌收縮加快加強(qiáng)。表現(xiàn)為收縮力變大，頻率增強(qiáng)；
3.3 加入阿托品，曲線快速下降，收縮頻率變慢，幅度減小，離體小腸活動減弱。腸道主要受副交感神經(jīng)支配，小腸有一個(gè)復(fù)雜的壁內(nèi)神經(jīng)叢，它的終末神經(jīng)元屬于膽堿能，主要與運(yùn)動有關(guān)，可被阿托品阻斷，從而使運(yùn)動受到抑制。阿托品對膽堿受體都有高度親和力，都可
以和受體產(chǎn)生可逆性結(jié)合，產(chǎn)生競爭性拮抗作用，阿托品與受體結(jié)合后，對節(jié)后膽堿能神經(jīng)支配的效應(yīng)細(xì)胞上的Ｍ受體有阻斷作用，所以平滑肌收縮頻率和收縮張力都減小。M-膽堿受體拮抗劑，能阻斷節(jié)后膽堿能神經(jīng)所支配的效應(yīng)器細(xì)胞上的'M受體，故可對坑Ach及擬膽堿藥的M樣作用。
3.4因?yàn)榘⑼衅纷璧K了Ach與M受體的作用，導(dǎo)致腸肌收縮的變化不規(guī)律。在實(shí)驗(yàn)的過程中，在滴加Ach和阿托品混合液時(shí)，離體腸肌的張力曲線沒有明顯的變化且不規(guī)律，有可能是因?yàn)榧尤氲腁ch和阿托品滴加順序問題，使得兩種液體沒有很好的混合。
4.結(jié)論
一定濃度的Ach可以促進(jìn)腸肌的運(yùn)動，而且促進(jìn)的作用是作用于M受體。
5.參考文獻(xiàn)
5.1[1]陸源、林國華、楊午鳴.機(jī)能學(xué)實(shí)驗(yàn)教程.第2版.北京科學(xué)出版社.2010.160～1625.2[2]張志雄.生理學(xué).第1版.上海.科學(xué)技術(shù)出版社，2009.105～111
【注】：因電腦死機(jī)導(dǎo)致小組實(shí)驗(yàn)操作數(shù)據(jù)丟失導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗，故小組各自分散進(jìn)入別的小組進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作。本實(shí)驗(yàn)報(bào)告數(shù)據(jù)來自于第八組。
1.從收縮的幅度越來越小可以看出細(xì)胞的興奮性越來越小，也可能是臺氏液沖洗腸肌標(biāo)本不充分，導(dǎo)致藥品液的混合，從而刺激作用不明顯；
2.適量濃度的腎上腺素和鹽酸有抑制腸肌細(xì)胞興奮的作用，適量濃度的氫氧化鈉有促進(jìn)其興奮的作用。
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